YR201901

一、产品简介

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被偶联抗原，样本中的残留物孔雀石绿将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗孔雀石绿抗体，加入酶结合物后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留物孔雀石绿的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应残留物孔雀石绿的含量。

二、适用范围

可定性定量检测水产（鱼、虾）等样品中孔雀石绿的残留量。

三、产品参数

详见说明书。

四、储存及有效期

储存条件：试剂盒保存于2-8℃，切勿冷冻；

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见外包装盒

五、检测步骤

使用前将试剂和微孔板回温至室温，用后放回2-8℃。

1、准备：取出需要数量的微孔板，其余的放入自封袋中，保存于2-8℃。建议每个样和标准液做2个平行试验。

2、加样：加入标准品/样品50μL/孔到相应的微孔中，然后加入酶结合物50μL/孔，最后加入抗体工作液50μL/孔，轻轻震荡混匀后，盖上盖板膜。

3、孵育：室温25℃避光反应30分钟。

4、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，加入洗涤液250μL/孔到微孔中，重复洗涤5次，每次间隔10秒，用吸水纸拍干（拍干后未清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

5、显色：依次加入底物液A 50μL/孔，底物液B 50μL/孔，轻轻震荡混匀后，盖上盖板膜，室温25℃避光反应15分钟。（亦可A、B液等体积混匀，加100μL/孔，按需即配即用。）

6、终止和读值：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630 nm检测，请在5分钟内读完数据），测定每孔OD值。（若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定）。

六、结果分析/判读

百分吸光率为标准品或样品的平均OD值除以零标准的平均OD值，再乘以100%，零标准为100%（最大吸光度值），其他OD值为最大吸光度的百分数。

B：标准溶液或样本溶液的平均吸光度

B₀：0ppb标准溶液的平均吸光度值

校准曲线

以log（标准品浓度）为横坐标，以Logit（B/B₀）为纵坐标，构建线性回归方程。将样品的Logit（B/B₀）值代入上述回归方程，求得的值乘以样本稀释倍数，即为样本中孔雀石绿的含量。