YR2F1601

一、产品简介

本试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被黄曲霉毒素B1抗体，样本中的黄曲霉毒素B1同酶结合物竞争预包被微孔板中的黄曲霉毒素B1抗体，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素B1的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应残留物黄曲霉毒素B1的含量。

二、适用范围

可定性定量检测谷物、配合饲料、玉米加工副产品（DDGS、玉米皮、胚芽粕/饼和玉米蛋白粉）、棉粕、豆粕、菜粕、柠檬酸渣、茶渣、TMR、青贮玉米等样本中黄曲霉毒素B1的含量。

三、产品参数

详见说明书。

四、储存及有效期

储存条件：试剂盒保存于2-8℃，切勿冷冻；

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见外包装盒

五、检测步骤

使用前将试剂和微孔板回温至室温，用后放回2-8℃。

1、准备：取出需要数量的微孔板，其余的放入自封袋中，保存于2-8℃。建议每个样品和标准液做2个平行试验。

2、加样、预混：加入标准品/样品60μL/孔到相应预混板孔，加酶结合物120μL/孔到每一预混板孔中。用多道移液器先将每孔反复吹打8次混匀，每混匀一条更换一次枪头，避免交叉污染。或采用酶标仪上的振板功能，设定振板时间10秒，来混匀每孔液体。注：请完全将每孔液体混匀后，再进行转移！

3、转移：用多道移液器按100μL/孔转移上述预混板孔中的液体到相应的预包被微孔板中，每转移一条更换一次枪头，避免交叉污染，盖上盖板膜。

4、孵育：室温25℃避光反应15分钟。

5、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，加入洗涤液250μL/孔到微孔中，重复洗涤5次，每次间隔10秒，用吸水纸拍干（拍干后未清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

6、显色：依次加入底物液A 50μL/孔，底物液B 50μL/孔，轻轻震荡混匀后，盖上盖板膜，25℃室温下避光反应5分钟。（或A、B液等体积混匀，加100μL/孔，按需即配即用）

7、终止和读值：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630 nm检测，请在5分钟内读完数据），测定每孔OD值。（若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定）。

六、结果分析/判读

百分吸光率为标准品或样品的平均OD值除以零标准的平均OD值，再乘以100%，零

标准为100%（最大吸光度值），其他OD值为最大吸光度的百分数。

B：标准溶液或样本溶液的平均吸光度

B₀：0ppb标准溶液的平均吸光度值

校准曲线

以log（标准品浓度）为横坐标，以Logit（B/B₀）为纵坐标，构建线性回归方程。将样品的Logit（B/B₀）值代入上述回归方程，求得的值乘以样本稀释倍数，即为样本中黄曲霉毒素B1的含量。