货号：YRMBP7013

检测原理：本试剂盒采用分子信标探针法实时荧光PCR技术，针对副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的ToxR基因和TDH基因设计特异性的引物和探针，用于副溶血弧菌和KP反应阳性副溶血弧菌的定性分型检测。由于检测KP反应阳性或阴性副溶血弧菌的特异性探针分别采用HEX和FAM两种不同的颜色的荧光基团标记，从而通过不同颜色的荧光增量来实时判断产毒/不产毒副溶血弧菌的存在。检测灵敏度为1500 CFU/mL。

规 格：48 T

组 成：详见说明书

适用仪器：ABI PRISM®7900、ABI PRISM®7500、ABI PRISM®7300、ABI PRISM®7700、ABI PRISM®7000、MJ Opticon、BIORAD iCycler、Roche LightCyclerTM、Qiagen Rotor Gene 等。

贮存条件：避光-20℃贮存，避免反复冻融。

操作步骤：

一． DNA提取

取增菌液1mL加到1.5mL无菌离心管中，12,000rpm离心3min，弃去上清；加入50µL DNA提取液，充分混匀后沸水浴5 min，13,000rpm离心5min，取上清液进行检测或保存于-20℃以待检测。

二． 扩增试剂准备

将PCR反应液以及Taq酶按照说明书的要求进行分装

三． 加样

在样品制备区将阳性对照以及待检测样本取出解冻，按照每个反应2µL的的量，往PCR管中加入样本RNA以及阳性对照。

四． PCR扩增

按照说明书的要求设置荧光基团以及扩增程序进行PCR反应。

详见说明书

结果判读：按照说明书的要求调整好扩增曲线的基线（Baseline）的Start值、Stop值以及阈值（Threshold）的Value值后确认阴性对照以及阳性对照的扩增曲线符合说明书的要求，观察样品的扩增曲线，按照说明书的要求对结果进行解读。

注意事项：

详见说明书